革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌鑒定卡說(shuō)明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱： 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌鑒定卡

英文名稱：VITEK 2 Gram-Positive Identification card (VITEK 2 GP Test Kit)

【包裝規(guī)格】

20 測(cè)試/盒

【預(yù)期用途】

用于來(lái)源于人體并經(jīng)過(guò)分離培養(yǎng)的常見具有臨床意義的革蘭氏陽(yáng)性菌的自動(dòng)鑒定。

【檢驗(yàn)原理】

GP鑒定卡基于已建立的生化方法2、3、7、8、9、10、11、14、20、21、22、23、27、32、37、39及新開發(fā)的底物，

共有檢測(cè)碳源利用、酶類活性和耐藥性的 43 種生化試驗(yàn)。最長(zhǎng)約需要8小時(shí)獲得最終鑒定

結(jié)果。

【主要組成成份】

詳見“附表 1 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌鑒定卡 GP 卡各孔成分"。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

原包裝袋內(nèi)密封儲(chǔ)存于 2～8℃。有效期 18 個(gè)月。

生產(chǎn)日期：詳見外包盒標(biāo)簽。

有效期至：詳見外包盒標(biāo)簽。

【適用儀器】

全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析儀（VITEK 2 System）型號(hào)：VITEK 2， VITEK 2 XL

全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（VITEK 2 Compact System）型號(hào)：VITEK 2 Compact

與 VITEK® 2 儀器一起使用時(shí)，GP 卡是一個(gè)用于常規(guī)鑒定大多數(shù)具有臨床意義的革蘭陽(yáng)

性細(xì)菌的完整系統(tǒng)。需要的材料有：

? VITEK 2 GP 卡

? 電子比濁儀（VITEK® 2 DensiCHEK™ 或 VITEK® 2 DensiCHEK™ Plus kit）

? 電子比濁儀標(biāo)準(zhǔn)濁度管（DensiCHEK™ Plus standards kit）

? VITEK 2 卡架

? 樣本稀釋液（0.45%～0.50%NaCl，pH 4.5～7.0）

? 12 mm x 75 mm 透明塑料（聚苯乙烯）一次性試管

? 無(wú)菌棒或拭子

? 合適的瓊脂培養(yǎng)基（參閱附表 2 培養(yǎng)要求表）

可選配件：

? 容積可調(diào)式鹽水分配器

? 接種環(huán)

? 預(yù)裝樣本稀釋液的試管（0.45%~0.50%NaCl 溶液，pH4.5~7.0）

? 試管帽

? 渦旋震蕩器

【樣本要求】

參閱“附表 2 培養(yǎng)要求表"獲取樣本準(zhǔn)備信息。

【檢驗(yàn)方法】

見適用儀器使用手冊(cè)。

警告：未遵守本部分有關(guān)執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室任務(wù)的說(shuō)明和建議，可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤或延遲。

欲詳細(xì)了產(chǎn)品具體信息，請(qǐng)參見培養(yǎng)要求表。

注：根據(jù)實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范，用純培養(yǎng)物制備接種物。如果是混合培養(yǎng)物，則需要重新分離。建議使用菌純度確認(rèn)平板，以確保用于試驗(yàn)的是純培養(yǎng)物。

1） 如果符合培養(yǎng)要求，從原代培養(yǎng)板上選擇分離的菌落；或者將要測(cè)試的細(xì)菌轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)沫傊囵B(yǎng)基上傳代培養(yǎng)和相應(yīng)孵育。

2） 以無(wú)菌方法，將 3.0 mL 無(wú)菌鹽水（0.45%至 0.50%NaCl 溶液，pH4.5 至 7.0）加入一個(gè)透明的塑料（聚苯乙烯）試管（12mm×75mm）中。

3） 使用無(wú)菌棒或拭子接種形態(tài)相同菌落至第二步中準(zhǔn)備的鹽水試管，使用經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的電子比濁儀 VITEK 2 DensiCHEKTM Plus 制備相當(dāng)于麥?zhǔn)蠞岫?0.50～0.63 均質(zhì)菌懸液；

注：接種卡片前，菌懸液配制后放置時(shí)間不得超過(guò) 30 分鐘。

4） 將菌懸液試管和 GP 卡放入卡架中。

5） 參閱適當(dāng)?shù)膬x器使用手冊(cè)，了解數(shù)據(jù)輸入說(shuō)明和如何向儀器中裝載卡架；

6）丟棄危險(xiǎn)性廢物時(shí)請(qǐng)遵循所在地監(jiān)管機(jī)構(gòu)的指南。

質(zhì)量控制

質(zhì)量控制細(xì)菌及其預(yù)期結(jié)果列在 VITEK® 2 GP 質(zhì)量控制表中。根據(jù)本文件中規(guī)定的試驗(yàn)菌株操作質(zhì)量控制。

認(rèn)證聲明

茲此證明，bioMerieux 符合 ISO 13485 和 FDA 質(zhì)量體系規(guī)范 (QSR)關(guān)于微生物鑒定系統(tǒng)設(shè)計(jì)、開發(fā)和制造的要求。

1、試驗(yàn)頻率

目前，建議遵循監(jiān)管機(jī)構(gòu)有關(guān)鑒定產(chǎn)品試驗(yàn)頻率的指南。通常做法是，在收到試劑盒時(shí)實(shí)施 QC。反應(yīng)必須符合說(shuō)明書結(jié)果。

如結(jié)果不符合標(biāo)準(zhǔn)，傳代純化之后重復(fù)試驗(yàn)，如結(jié)果仍然不符合標(biāo)準(zhǔn)，采用其它鑒定方法，并聯(lián)系 bioMerieux。

2、質(zhì)控菌試驗(yàn)和儲(chǔ)存

? 依廠商說(shuō)明復(fù)溶菌株；

? 采用含 5% 羊血的胰酶大豆瓊脂（TSAB），在 35°C 至 37°C 和 5% 至 10% CO2 條件下培養(yǎng)大約 18 至 24 小時(shí)。

? 檢查純度。實(shí)施第二次傳代培養(yǎng)，以便試驗(yàn)。

? 采用含 5% 羊血的胰酶大豆瓊脂（TSAB），在 35°C 至 37°C 和 5% 至 10% CO2 條件下培養(yǎng)大約 18 至 24 小時(shí)。

3、儲(chǔ)存條件

短期保存條件

1） 傳代至 TSAB 瓊脂或斜面；

2） 在 35°C 至 37°C 和 CO2 濃度為 5% 至10% 條件下孵育 24 小時(shí)。

3） 在 2°C 至 8°C 下冷藏最長(zhǎng)兩周。

4） 按上述要求傳代培養(yǎng)一次，以便用于質(zhì)控。

長(zhǎng)期保存條件

1） 用 含 15% 甘油的胰酶大豆肉湯（TSB）配制濃菌懸液。

2） - 70℃冷凍保存；

3） 質(zhì)控前在 TSAB 上傳代兩次。

注：避免反復(fù)凍融，把冷凍保存菌株分裝為單份使用或用無(wú)菌涂布棒從冷凍保存的菌中取出少部分使用。

精簡(jiǎn)質(zhì)量控制

注：只限工業(yè)使用的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該遵循精簡(jiǎn)質(zhì)量控制部分中的內(nèi)容實(shí)施質(zhì)量控制。這些用戶無(wú)需額外試驗(yàn)。

因?yàn)椴缓谶\(yùn)輸條件下容易降解的底物，可以通過(guò)試驗(yàn)兩個(gè)菌株實(shí)施精簡(jiǎn)質(zhì)量控制：一個(gè)在GP 卡上反應(yīng)大多數(shù)情況是陽(yáng)性，另外一個(gè)在 GP 卡上反應(yīng)大多數(shù)情況是陰性。（請(qǐng)參見 GP質(zhì)量控制表了解詳情。）

全面質(zhì)量控制

不符合精簡(jiǎn)質(zhì)量控制測(cè)試要求的客戶，需要實(shí)施全面質(zhì)量控制試驗(yàn)，以便證明針對(duì)某鑒定產(chǎn)品每種底物的陽(yáng)性和陰性反應(yīng)。

欲在開始就符合精簡(jiǎn)質(zhì)量控制測(cè)試要求，CLSI® M50-A 標(biāo)準(zhǔn)要求用戶實(shí)施和記錄以下兩項(xiàng)中的一項(xiàng)：

• 完成驗(yàn)證試驗(yàn)，以證明其性能符合制造商聲稱的性能。

• 實(shí)施全面質(zhì)量控制測(cè)試，應(yīng)該在至少三個(gè)不同季節(jié)至少對(duì)三批產(chǎn)品實(shí)施。

請(qǐng)參閱完整的 CLSI® M50-A 標(biāo)準(zhǔn)，了解如何保持符合要求，以及精簡(jiǎn)質(zhì)量控制測(cè)試對(duì)于用戶和制造商雙方的要求和責(zé)任。

GP 卡質(zhì)量控制表：

Enterococcus casseliflavus 鉛黃腸球菌 ATCC® 700327™（用于精簡(jiǎn)或全面質(zhì)量控制）

Streptococcus salivarius ssp. thermophilus 唾液鏈球菌嗜熱亞種 ATCC® 19258™（用于全面質(zhì)量控制）

Kocuria kristinae 克氏庫(kù)克菌 ATCC® BAA-752™（用于全面質(zhì)量控制）

Listeria monocytogenes 單核細(xì)胞增多李斯特菌 ATCC® BAA-751™（用于全面質(zhì)量控制）

Streptococcus pneumoniae 肺炎鏈球菌 ATCC® 49619™（用于全面質(zhì)量控制）

Staphylococcus saprophyticus 腐生葡萄球菌 ATCC® BAA-750™（用于精簡(jiǎn)或全面質(zhì)量控制）

Staphylococcus sciuri 松鼠葡萄球菌 ATCC® 29061™（用于全面質(zhì)量控制）

Streptococcus equi ssp. zooepidemicus 馬鏈球菌獸瘟亞種 ATCC® 43079™（用于全面質(zhì)量控制）

Enterococcus saccharolyticus 解糖腸球菌 ATCC® 43076™（用于全面質(zhì)量控制）

鑒定質(zhì)量控制細(xì)菌時(shí)，GP 卡的結(jié)果通常是單選，或在低分辨率或相似細(xì)菌鑒定結(jié)果內(nèi)。但質(zhì)控菌株的選擇是基于反應(yīng)性能而非鑒定性能。因此，在所有預(yù)期的反應(yīng)均正確時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)不能鑒定或鑒定錯(cuò)誤的結(jié)果。